人非肌肉肌球蛋白轻链激酶N端表达载体的构建及其在大肠杆菌中的表达

胡若磊; 朱华庆; 周青; 桂淑玉; 汪渊

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目的构建人非肌肉肌球蛋白轻链激酶(hnmMLCK)N端表达载体及其体外表达与表达产物的纯化. 方法用PCR方法扩增hnmMLCK的N端cDNA,插入质粒pBK-cmv中构建成表达载体,转化入大肠杆菌XL1-blue, 经IPTG诱导表达,表达产物用电洗脱的方法初步纯化. 结果经限制性内切酶酶切图谱分析和DNA序列测定证明所构建质粒为hnmMLCK重组质粒,SDS-PAGE证实获得分子量为21 ku的融合蛋白,表达量约占菌体总蛋白的21%. 结论成功构建了重组 hnmMLCK表达载体,并在大肠杆菌中获得表达,为进一步研究及临床应用奠定了良好基础.

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来源
《安徽医科大学学报》 |2002年第1期|11-13|共3页
作者
胡若磊; 朱华庆; 周青; 桂淑玉; 汪渊;
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作者单位

安徽医科大学分子生物学实验室,合肥,230032;

安徽医科大学分子生物学实验室,合肥,230032;

安徽医科大学分子生物学实验室,合肥,230032;

安徽医科大学第一附属医院呼吸内科,合肥,230022;

安徽医科大学分子生物学实验室,合肥,230032;

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正文语种 chi
中图分类医学遗传学;
关键词
肌球蛋白轻链激酶; 聚合酶链反应; 大肠杆菌; 人;

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