杜氏盐藻促有丝分裂活化蛋白激酶DsMAPK的原核表达及纯化（英文）

岳文静; 柴晓杰; 刘丽颖; 武天祥; 刘艺琼

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盐藻是研究植物耐盐机制的重要模式生物,而MAPK基因在植物耐盐分子途径中起重要作用。该试验通过PCR扩增Ds MAPK基因的开放阅读框(ORF),并将其克隆至带有GST标签的原核表达载体p GS-21a,得到重组表达载体p GS-21a-MAPK。将重组表达载体转化E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达,然后对融合蛋白进行表达形式分析,利用GSTSefinoseTMKit进行纯化,所得产物进行SDSPAGE和Western blot鉴定。结果表明,该试验成功构建了重组表达载体p GS-21a-MAPK,经IPTG诱导后表达的融合蛋白与预期相符,纯化后的上清蛋白经Western blot检测显示该融合蛋白能与抗GST单克隆抗体特异性结合,具有良好的免疫学活性,Ds MAPK的成功表达为进一步在蛋白质水平上研究其在盐藻耐盐机制中的作用奠定了基础。

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来源
《农业科学与技术：英文版》 |2015年第1期|12-15|共4页
作者
岳文静; 柴晓杰; 刘丽颖; 武天祥; 刘艺琼;
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作者单位

农业部北方海水增养殖重点实验室/辽宁省海洋生物资源恢复与生境修复重点实验室;

大连海洋大学;

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正文语种 chi
中图分类农业科学;
关键词
杜氏盐藻; DsMAPK; 原核表达; 纯化;

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