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白藜芦醇通过调控微小RNA-574-3p对高糖环境下肾小球系膜细胞增殖、炎症水平及氧化应激的影响研究

         
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目的探讨白藜芦醇是否通过微小RNA(miRNA)-574-3p影响糖尿病肾病细胞的增殖、炎症水平及氧化应激。方法在2019年1月1日至2020年6月1日,将大鼠肾小球系膜细胞(RMC)分为NG组(5.3 mmoL葡萄糖)、HG组(30 mmoL葡萄糖)、HG+低剂量组(30 mmoL葡萄糖+5µmoL白藜芦醇)、HG+中剂量组(30 mmoL葡萄糖+10µmoL白藜芦醇)、HG+高剂量组(30 mmoL葡萄糖+20µmoL白藜芦醇)、HG+中剂量+anti-miR-NC组(30 mmoL葡萄糖+10µmoL白藜芦醇+转染anti-miR-NC)、HG+中剂量+anti-miR-574-3p组(30 mmoL葡萄糖+10µmoL白藜芦醇+转染anti-miR-574-3p)。应用噻唑基蓝四唑溴化物(MTT)法、蛋白质印迹法(western blotting)、Transwell法、实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)、酶联免疫吸附测定(ELISA)、试剂盒分别检测RMC增殖、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)表达、p21表达、细胞迁移、miR-574-3p表达、白细胞介素(IL)-1β、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、丙二醛、乳酸脱氢酶(LDH)水平。结果与NG组相比,HG组RMC的细胞活性(1.97±0.039比1.39±0.02)、Cyclin D1蛋白表达量、细胞迁移数、IL-1β(70.44±1.74比20.67±0.78)µg/L、TNF-α、丙二醛(49.22±1.06比13.33±0.67)µmoL/g、LDH水平升高,p21蛋白表达量、miR-574-3p表达量降低(0.27±0.02比1.04±0.02),差异有统计学意义(P<0.05)。与HG组相比,HG+低剂量组、HG+中剂量组和HG+高剂量组RMC细胞活性(1.74±0.02比1.97±0.03,1.64±0.02比1.97±0.03,1.53±0.01比1.97±0.03)、Cy‐clin D1蛋白表达量、细胞迁移数、IL-1β(53.33±1.53比70.44±1.74,40.78±1.34比70.44±1.74,28.33±1.20比70.44±1.74)µg/L、TNF-α、丙二醛(41.22±0.86比49.22±1.06,30.78±0.91比49.22±1.06,20.89±0.71比49.22±1.06)µmoL/g、LDH水平均降低,p21蛋白表达量、miR-574-3p表达量(0.48±0.02比0.27±0.02,0.65±0.01比0.27±0.02,0.83±0.02比0.27±0.02)升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与HG+中剂量组相比,HG+中剂量+anti-miR-574-3p组RMC的细胞活性(1.91±0.02比1.66±0.03)、Cyclin D1蛋白表达量、细胞迁移数、IL-1β(63.33±1.15比41.78±1.79)µg/L、TNF-α、丙二醛(51.56±1.52比35.89±1.28)µmoL/g、LDH水平均升高,p21蛋白表达量降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论白藜芦醇可能通过上调高糖诱导的大鼠肾小球系膜细胞中miR574-3p表达,抑制细胞增殖、迁移,并减轻其炎症水平和氧化应激。

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