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血管内皮生长因子、基质细胞衍生因子-1基因对人微血管内皮细胞增殖、迁移、凋亡的影响

         
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目的 探讨血管内皮生长因子(VEGF)、基质细胞衍生因子-1(SDF-1)基因对人微血管内皮细胞(HMEC-1)增殖、迁移、凋亡的影响.方法 体外培养HMEC-1,以小干扰RNA(siRNA)介导低表达VEGF、SDF-1处理细胞,分组为Ⅰ组(空白对照组)、Ⅱ组(转染非特异性对照组)、Ⅲ组(转染si VEGF组)、Ⅳ组(转染si SDF-1组).检测各组细胞增殖、迁移、凋亡的情况.West-ern Blot检测细胞中VEGF、SDF-1的表达情况,MTT和流式细胞分析检测HMEC-1增殖和凋亡能力的变化情况,划痕愈合实验检测HMEC-1迁移能力.结果 转染了VEGF165-siRNA后,Ⅲ组VEGF165、SDF-1蛋白的表达强度(0.48±0.07)、(0.62±0.08)均明显弱于Ⅰ组(1.92±0.42)、(1.29±0.38)和Ⅱ组(1.87±0.35)、(1.32±0.47),差异有统计学意义(t=9.836,8.279,7.846,8.045,P0.05).Ⅰ组与Ⅱ组比较,VEGF165、SDF-1蛋白表达水平差异无统计学意义(P>0.05).经siRNA转染后,Ⅲ组、Ⅳ组细胞均出现增殖抑制率(42.37±1.25)％、(29.15±1.32)％和凋亡率(21.6±1.8)％、(16.8±1.6)％明显增高,与Ⅰ组、Ⅱ组增殖抑制率0.00％、(0.24±0.02)％和凋亡率(4.9±0.4)％、(5.2±0.5)％比较,差异有统计学意义(P0.05).细胞迁移实验中,Ⅰ组、Ⅱ组、Ⅲ组、Ⅳ组迁移距离分别为(579.65±11.59)μm、(553.76±9.47)μm、(234.72±10.28)μm、(318.36±9.95)μm,Ⅲ组和Ⅳ组细胞明显少于Ⅰ组和Ⅱ组,差异有统计学意义(t=10.972,9.894,8.426,7.904,P0.05),其中Ⅲ组和Ⅳ组之间比较,Ⅲ组细胞明显少于Ⅳ组,差异有统计学意义(t=5.907,P<0.05).结论 VEGF、SDF-1基因均参能促进HMEC-1的增殖和迁移能力,并抑制HMEC-1的凋亡水平,从而可能在糖尿病血管病变发生发展中发挥作用,且在此过程中VEGF对SDF-1表达具有调节机制.

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