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人CDK2-AP1(DOC-1)酵母双杂交诱饵质粒自激活作用鉴定

         

摘要

目的 验证诱饵质粒pBD-DOC-1在酵母双杂交系统的自激活性及毒性作用,为应用酵母双杂交系统(yeast two-hybrid system)筛选与p12DOC-1/CDK2-AP1相互作用的蛋白建立实验基础.方法 将诱饵质粒pBD-DOC-1转化到酵母细胞MAV203中,检测诱饵蛋白有无毒性和自激活作用.同时利用对照质粒组筛选组氨酸(His)本底表达抑制剂3AT(3-氨基-1,2,4-三唑)的合适工作浓度.结果 诱饵质粒pBD-DOC-1成功转化到酵母细胞MAV203中,对宿主酵母细胞无毒性,对报告基因无自激活作用.确定了组氨酸(His)本底表达抑制剂3AT(3-氨基-1,2,4-三唑)的合适工作浓度.结论 诱饵质粒pBD-DOC-1可以用于酵母双杂交实验,为进一步运用酵母双杂交技术在人类组织cDNA文库中筛选与之相互作用的蛋白奠定了基础.

著录项

  • 来源
    《北京口腔医学》 |2010年第1期|5-7,17|共4页
  • 作者单位

    710032,西安,第四军医大学口腔医学院口腔颌面-头颈肿瘤外科;

    710032,西安,第四军医大学口腔医学院口腔颌面-头颈肿瘤外科;

    中国科学院遗传与发育生物学研究所;

    中国科学院遗传与发育生物学研究所;

    中国科学院遗传与发育生物学研究所;

    710032,西安,第四军医大学口腔医学院口腔颌面-头颈肿瘤外科;

    710032,西安,第四军医大学口腔医学院口腔颌面-头颈肿瘤外科;

    710032,西安,第四军医大学口腔医学院口腔颌面-头颈肿瘤外科;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 R349.6;
  • 关键词

    p12DOC-1/CDK2-AP1; 酵母双杂交; 自激活;

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