基于反转录环介导等温扩增技术检测大肠杆菌O157

梁玉林; 刘秀; 周鹏飞; 周振森; 尹建军

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基于反转录环介导等温扩增技术检测大肠杆菌O157

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建立反转录环介导等温扩增(Reverse transcriptase loop-mediated isothermal amplification RT-LAMP)方法特异性检测大肠杆菌O157.针对大肠杆菌O157的特异性保守rfbE基因设计多组引物,通过对引物筛选和反应条件优化,建立了检测大肠杆菌O157的实时荧光RT-LAMP方法.利用大肠杆菌O157及其人工污染脱脂乳样品,研究了方法的特异性和灵敏度,并与rRT-PCR(Real-time fluorescent quantitative reverse transcription polymerase chain reaction)方法的灵敏度进行比较.结果显示,等温65℃条件下,30 min内能完成RT-LAMP扩增反应.所建立的实时荧光RT-LAMP方法特异性强,除了2株大肠杆菌O157以外其余菌株均未产生特异性扩增反应.同时该方法灵敏度高,对人工污染脱脂乳样品检测灵敏度能达到20 CFU/g,比rRT-PCR方法高10倍.建立的实时荧光RT-LAMP方法将为大肠杆菌O157现场快速检测提供有力手段.

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来源
《生物技术通报》 |2018年第6期|59-65|共7页
作者
梁玉林; 刘秀; 周鹏飞; 周振森; 尹建军;
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作者单位

中国食品发酵工业研究院,北京 100015;

中国食品发酵工业研究院,北京 100015;

中国食品发酵工业研究院,北京 100015;

中国食品发酵工业研究院,北京 100015;

中国食品发酵工业研究院,北京 100015;

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正文语种 chi
中图分类
关键词
反转录-环介导等温扩增; 大肠杆菌O157; 检测; 脱脂乳;

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