磷脂酰肌醇蛋白聚糖3的原核表达及单克隆抗体制备

程华; 方向东; 吴萌; 史蕾; 崔硕

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磷脂酰肌醇蛋白聚糖3的原核表达及单克隆抗体制备

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人磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC3)是一个肝癌潜在的诊断标志物和治疗靶点.为获得抗GPC3单克隆抗体,用PCR方法克隆GPC3基因,利用酶切位点将该序列插入pGEX-2T载体,构建了pGEX-2T-gpc3表达载体.转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株,经IPTG诱导,获得高效表达.经纯化后获得分子量为58 kD的蛋白.以该重组蛋白为免疫原,通过免疫BALB/c小鼠,经过细胞融合和筛选获得1株抗该重组蛋白的单克隆抗体1F3.Western blot分析显示,该抗体具有较好的特性,可用于GPC3蛋白的功能和应用研究.

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来源
《生物技术通报》 |2014年第3期|177-181|共5页
作者
程华; 方向东; 吴萌; 史蕾; 崔硕;
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作者单位

河北省科学院生物研究所,石家庄050081;

中国科学院北京基因组研究所,北京100101;

河北省科学院生物研究所,石家庄050081;

河北师范大学生命科学学院,石家庄050000;

河北省科学院生物研究所,石家庄050081;

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正文语种 chi
中图分类
关键词
磷脂酰肌醇蛋白聚糖3; 蛋白表达; 单克隆抗体;

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