毕赤酵母表达重组葡萄糖氧化酶的发酵条件

王帅坤; 郝杰清; 王振伟; 师慧; 孟延发

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毕赤酵母表达重组葡萄糖氧化酶的发酵条件

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对甲醇诱导重组Pichia pastoris GS115 mut+高效表达黑曲霉葡萄糖氧化酶基因的条件进行了研究,拟建立一条高效低成本的生产重组葡萄糖氧化酶的工艺路线.通过摇瓶试验对发酵培养基、诱导时机、pH、诱导温度、甲醇诱导浓度等进行了优化,随后进行了50L发酵罐扩大化培养.结果表明,最适发酵培养基为YEPD培养基,甲醇诱导产酶的最佳时机为菌体对数生长末期,最佳诱导浓度为1％,最适诱导pH范围为6-6.5,最适诱导温度25℃.按优化的条件用50 L发酵罐分批培养酵母14 h,甲醇诱导培养48 h后生物量和酶活性达到最高.菌体终密度达到OD600为44,每升发酵液中产酶105 kU,发酵液上清蛋白含量为1 000 mg/L.

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来源
《生物技术通报》 |2013年第9期|136-141|共6页
作者
王帅坤; 郝杰清; 王振伟; 师慧; 孟延发;
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作者单位

四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室,成都610064;

四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室,成都610064;

四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室,成都610064;

四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室,成都610064;

四川大学生命科学学院生物资源与生态环境教育部重点实验室,成都610064;

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正文语种 chi
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关键词
葡萄糖氧化酶; 毕赤酵母; 诱导表达; 高密度发酵;

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