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柔嫩艾美耳球虫钙依赖蛋白激酶3基因在毕赤酵母中的表达及分析

         

摘要

旨在真核表达系统中高效表达柔嫩艾美耳球虫钙依赖蛋白激酶3(Eimeria tenella calcium-dependent protein kinase-3,EtCDPK3),获得有活性的天然蛋白,利用毕赤酵母表达系统对该基因进行了表达.将EtCDPK3基因连接到毕赤酵母表达载体pPIC9K上,构建重组质粒pPIC9K-EtCDPK3.重组质粒通过电击转化入酵母细胞GS115后,用组氨酸缺陷培养基和G418分别进行筛选,获得含重组质粒的酵母表达细胞.重组酵母细胞在含1%甲醇的BMMY培养基中诱导产生目的蛋白,培养收集1-4d的部分上清.经SDS-PAGE检测,所表达的蛋白相对分子质量约为49 kD.Western blotting表明,该蛋白能与兔抗EtCDPK3血清特异性结合.结果表明,柔嫩艾美耳球虫CDPK3基因在毕赤酵母中成功地进行了表达.

著录项

  • 来源
    《生物技术通报》 |2012年第4期|108-112|共5页
  • 作者单位

    上海师范大学生命与环境科学学院,上海200234;

    中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点开放实验室,上海200241;

    中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点开放实验室,上海200241;

    中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点开放实验室,上海200241;

    中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点开放实验室,上海200241;

    中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点开放实验室,上海200241;

    中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点开放实验室,上海200241;

    中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点开放实验室,上海200241;

    中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点开放实验室,上海200241;

    中国农业科学院上海兽医研究所农业部动物寄生虫学重点开放实验室,上海200241;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类
  • 关键词

    柔嫩艾美耳球虫; 钙依赖蛋白激酶3; 真核表达; 毕赤酵母;

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