BenA3基因双元载体的初步构建及转化绿僵菌189的初步研究

姚洪平; 王广君; 张泽华; 农向群; 魏松红

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用XholⅠ和SalⅠ分别双酶切植物表达载体pCAMBIA1300和含有目的基因的pMD19-T-BenA3,定向连接得到重组质粒pCAMBIA1300-BenA3,将其导入农杆菌AGL-1.经PCR鉴定后,得到可用于绿僵菌转化的农杆菌双元载体.采用的预培养时间、菌液浓度、共培养时间、乙酰丁香酮浓度的条件下,进行农杆菌介导绿僵菌的遗传转化,得到可以稳定性遗传的绿僵菌转化子,随机挑选转化子进行苯菌灵抗性基因的PCR扩增表明,绿僵菌转化子含有了苯菌灵抗性基因.该转化体系的建立,将有利于绿僵菌生防功能基因的克隆和作用机制的研究.

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来源
《生物技术通报》 |2010年第8期|214-217|共4页
作者
姚洪平; 王广君; 张泽华; 农向群; 魏松红;
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作者单位

沈阳农业大学植物保护学院,沈阳,110161;

中国农业科学院植物保护研究所,植物病虫害生物学国家重点实验室,北京,100193;

中国农业科学院植物保护研究所,植物病虫害生物学国家重点实验室,北京,100193;

中国农业科学院植物保护研究所,植物病虫害生物学国家重点实验室,北京,100193;

中国农业科学院植物保护研究所,植物病虫害生物学国家重点实验室,北京,100193;

沈阳农业大学植物保护学院,沈阳,110161;

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正文语种 chi
中图分类
关键词
BenA3基因; pCAMBIA1300-BenA3; 农杆菌; 双元载体; 绿僵菌; 转化;

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