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小麦TaEDR1基因dsRNAi表达载体的构建及遗传转化

         

摘要

从抗白粉病小麦(Triticum aestivum L.)品系99/2439中分离到一个编码促分裂原蛋白激酶激酶激酶的新基因TaEDR1。为了研究TaEDR1基因在小麦抗白粉菌(Blumeria graminis(DC.)E.O.Speerf.sp.tritici Em.Marcha1)反应中的作用,以单子叶植物高效表达载体pAHC25为基础载体,选择TaEDR1基因编码胞外结构域的、保守性低的cDNA区域作为RNA干扰的目标区段,将这个区段连接成一个反向重复序列(3’→5’//5’←3’),插入到玉米泛素高效启动子Ubi1的下游,构建成双链RNA干扰表达载体pAH—R—TER。利用花粉管通道技术,以高产小麦新品种“周麦18”为受体进行了遗传转化。T0代植株经PPT抗性鉴定、PCR扩增检测,获得了7个转基因植株,为研究小麦TaEDR1基因的功能奠定了基础。

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