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人肝癌细胞HepG2与正常肝细胞L02的Ο-糖链的比较分析

         
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摘要

HepG2 ( a primary hepatocellular carcinoma cell line ) and L02 ( ones derived from normal liver tissue) cells were chosen as model cell lines for research. The O-glycans of the total proteins extracted from HepG2 and L02 cells were released by Carlson reductive β-elimination. The released O-glycans previously purified by Dowex 50 WX8-400 cation exchange resin and C18 cartridges were identified by electrospray ioniza-tion mass spectrometry( ESI-MS) and MS/MS. For comparision studies, β-cyclodextrin was used as the inter-nal standard for relative quantitative analysis of the O-glycans derived from HepG2 and L02 cells by MS. As results, 10 O-glycans were observed in HepG2 cell line and 9 O-glycans were detected in L02 cell line. More-over, 9 O-glycans were observed in both HepG2 and L02 cells, wherears 1 truncated O-glycan assigned as H1A1(NeuAc-GalNAc, sialyl Tn antigen, ubiquitous in cancer cells), was only found in HepG2 cells. t-Test results show that 5 and 2 O-glycans in HepG2 cells have significant differences ( P<0. 01 and P<0. 05 , recpectively) , when compared to those of L02 cells. Our studies show methodological significance in structural investigation of O-glycans expressed in hepatocellular carcinoma and early biomarker discovery in clinical diag-nose.%以培养的原发性肝细胞癌HepG2细胞和正常肝细胞L02为研究对象,用细胞裂解液提取总蛋白,然后采用Carlson还原性β-消除法释放O-糖链,以阳离子交换柱结合C18柱纯化分离O-糖链,用电喷雾电离质谱( ESI-MS)和串联质谱( MS/MS)对O-糖链进行序列鉴定,以β-环糊精为内标对2种细胞系的O-糖链进行定量比较分析.结果表明,在肝癌细胞系HepG2中检测到10种O-糖链,正常细胞系L02中检测到9种O-糖链,其中9种O-糖链是2种细胞系中共有的,但HepG2中存在癌细胞中特有的缩短的O-糖链N1A1( NeuAc-GalNAc, sialyl Tn 抗原). t检验结果表明, HepG2与L02相比,在检测到的10种O-糖链中有5种的含量具有极显著性差异(P<0.01),2种的含量具有显著性差异(P<0.05).

著录项

  • 来源
    《高等学校化学学报》 |2015年第7期|1275-1281|共7页
  • 作者

    潘丽英; 顾笑; 王承健; 强珊; 黄琳娟; 张英; 王仲孚;

  • 作者单位

    西北大学生命科学学院;

    西部资源生物与现代生物技术教育部重点实验室;

    西安710069;

    西北大学生命科学学院;

    西部资源生物与现代生物技术教育部重点实验室;

    西安710069;

    西北大学生命科学学院;

    西部资源生物与现代生物技术教育部重点实验室;

    西安710069;

    西北大学生命科学学院;

    西部资源生物与现代生物技术教育部重点实验室;

    西安710069;

    西北大学生命科学学院;

    西部资源生物与现代生物技术教育部重点实验室;

    西安710069;

    西北大学生命科学学院;

    西部资源生物与现代生物技术教育部重点实验室;

    西安710069;

    西北大学生命科学学院;

    西部资源生物与现代生物技术教育部重点实验室;

    西安710069;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 多糖;
  • 关键词

    原发性肝癌细胞HepG2; 正常人肝细胞L02; O-糖链; 电喷雾电离质谱;

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