Fe(Ⅱ)/2-酮戊二酸依赖型双加氧酶重组大肠杆菌全细胞催化合成4-羟基异亮氨酸

张文丽; 聂尧; 景晓冉; 徐岩

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以L-异亮氨酸(L-ILe)为底物,以异源表达Fe(Ⅱ)/2-酮戊二酸依赖型双加氧酶的重组大肠杆菌BL21/pET28a-ido全细胞作为催化剂,催化合成4-羟基异亮氨酸(4-HIL).基于重组异亮氨酸双加氧酶(IDO)催化异亮氨酸羟基化的性质和条件,在摇瓶水平上对辅因子亚铁离子、 α-酮戊二酸(α-KG)及底物浓度进行了单因素优化.获得的最佳反应条件为2 g/L FeSO4·7H2 O,底物与α-KG摩尔比为1:1,该条件下反应8 h可生成190 mmol/L 4-HIL.结合摇瓶水平的最优条件,在反应器水平上继续对搅拌速度、菌体浓度等进行优化,实现了对高底物浓度下催化反应的连续调控.在50 g/L湿菌体及400 r/min转速下可一次转化合成400 mmol/L 4-HIL,建立了全细胞催化合成4-羟基异亮氨酸的工艺流程.

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来源
《高等学校化学学报》 |2019年第6期|1172-1177|共6页
作者
张文丽; 聂尧; 景晓冉; 徐岩;
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作者单位

江南大学生物工程学院;

工业生物技术教育部重点实验室;

无锡214122;

江南大学生物工程学院;

工业生物技术教育部重点实验室;

无锡214122;

江南大学生物工程学院;

工业生物技术教育部重点实验室;

无锡214122;

江南大学生物工程学院;

工业生物技术教育部重点实验室;

无锡214122;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类 O621.25;
关键词
L-异亮氨酸; 全细胞催化; 4-羟基异亮氨酸; 双加氧酶; 过程调控;

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