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荧光毛细分析法测定丙酮酸的研究

         

摘要

基于荧光毛细分析法(Fluorescence Capillary Analysis,FCA)和液态酶(liquid enzyme method,LE)催化反应,开发了一种荧光毛细法测定丙酮酸的方法(P-LE-FCA).在激发波长350nm、发射波长460nm,磷酸缓冲液pH=7.50,温度38℃,酶浓度5.0kUL-1,NADH为1.0mmol·L-1的条件下,成功对尿样中的丙酮酸进行了测定.标准曲线的线性范围为0.2mmol·L-1~1.2 mmol·L-1,r=0.9942,检出限为0.012 mmol·L-1.P-LE-FCA法操作简便,样品用量仅为18μL,测定成本低,可实现丙酮酸的微量化测定.有望将酶固定在毛细管壁上,制成荧光毛细丙酮酸测试盒,用于含丙酮酸的实际样品的测定.

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