虾肝肠胞虫Taqman荧光PCR方法的建立与应用

张娜; 谢艳辉; 陈进会; 李家侨; 斯泽恩; 黄磊

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虾肝肠胞虫Taqman荧光PCR方法的建立与应用

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为给虾肝肠胞虫(EHP)的监测和控制工作提供特异、灵敏的快速检测方法,针对EHP 18S相关保守序列设计1对特异性引物,优化并建立EHP的Taqman荧光PCR检测方法,同时验证该方法的重复性和敏感性.结果显示:体系扩增的最佳退火温度为60℃,构建好的质粒标准品标准曲线斜率为-3.195,R2为0.991;扩增产物阈值循环数(Ct)与标准模板起始量(X)的关系曲线为-3.195×Log(X)+36.923,扩增效率为105.59.使用所构建方法检测湛江市EHP流行情况,同时对样品进行白斑综合症病毒(WSSV)、传染性皮下和造血器官坏死病毒(IHHNV)、桃拉综合征病毒(TSV)、早期死亡综合症(AHPND)病毒检测.结果显示:样品的WSSV、IHHNV、TSV检测均为阴性;AHPND检出阳性率为10%,EHP为30%,其中1份样品的EHP和AHPND检测同为阳性.本研究建立的EHP荧光PCR方法具有特异、灵敏等优点.该方法及其临床应用数据可为EHP的防控提供技术参考.

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来源
《中国动物检疫》 |2017年第10期|98-103|共6页
作者
张娜; 谢艳辉; 陈进会; 李家侨; 斯泽恩; 黄磊;
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作者单位

湛江出入境检验检疫局,广东湛江 524000;

湛江出入境检验检疫局,广东湛江 524000;

东莞出入境检验检疫局,广东东莞 441900;

湛江出入境检验检疫局,广东湛江 524000;

湛江出入境检验检疫局,广东湛江 524000;

湛江出入境检验检疫局,广东湛江 524000;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类各种虾的病虫害及其防治;
关键词
虾肝肠胞虫; 南美白对虾; Taqman荧光PCR;

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