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鸡毒支原体LAMP可视化检测方法的建立

         

摘要

为建立一种鸡毒支原体(MG)的快速检测方法,本研究根据GenBank中MG的基因保守序列,设计1套特异性环介导等温扩增(LAMP)引物,优化反应条件,建立了MG LAMP的可视化检测方法.该方法的敏感性可达10 fg/μL,高于常规PCR方法100倍;其特异性好,对其他的鸡常见病原体的检测结果均为阴性.MG LAMP反应只需一个可控温的水浴锅,在1h内完成全部反应,通过肉眼观察颜色直接判定结果.本研究建立的LAMP方法具有灵敏度高、特异性好、操作简便的优点,可用于MG感染的快速检测.%A loop-mediated isothermal amplification (LAMP) assay was developed for detection of mycoplasma galliseptic-um(MG). According to the sequences of MG in GenBank, six primers were designed, and the reaction conditions were optimized. The results showed that the detection limit of this LAMP method was 10 fg/μL, which was 102-fold higher than the routine PCR. There was no cross-reactivity with the other pathogen of chicken. The amplification could be finished by water bath within 1 h, and the presence of MG could be detected and visualized by naked eyes. These results suggested that this LAMP assay was a simple and specific method for rapid detection of MG of clinical samples.

著录项

  • 来源
    《中国畜牧兽医》 |2012年第9期|30-33|共4页
  • 作者单位

    广西兽医研究所,广西畜禽疫苗新技术重点实验室,广西南宁 530001;

    广西兽医研究所,广西畜禽疫苗新技术重点实验室,广西南宁 530001;

    广西兽医研究所,广西畜禽疫苗新技术重点实验室,广西南宁 530001;

    广西兽医研究所,广西畜禽疫苗新技术重点实验室,广西南宁 530001;

    广西兽医研究所,广西畜禽疫苗新技术重点实验室,广西南宁 530001;

    广西兽医研究所,广西畜禽疫苗新技术重点实验室,广西南宁 530001;

    广西兽医研究所,广西畜禽疫苗新技术重点实验室,广西南宁 530001;

    广西兽医研究所,广西畜禽疫苗新技术重点实验室,广西南宁 530001;

    广西兽医研究所,广西畜禽疫苗新技术重点实验室,广西南宁 530001;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 基因工程(遗传工程);
  • 关键词

    鸡毒支原体; 环介导等温扩增; 可视化检测;

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