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猪伪狂犬病毒的分离鉴定及其部分毒力基因序列遗传变异分析

         

摘要

为了解吉林省猪伪狂犬病毒(PRV)的遗传变异情况,本研究将采集自吉林省疑似发生猪伪狂犬病的临床样品,通过细胞传代、PCR检测和测序分析进行病毒分离鉴定.TCID50法测定分离毒株的病毒滴度,通过家兔感染试验测定分离毒株对家兔的致病性.对TK、gB、gC、gD和gE基因进行PCR扩增和测序,分析其遗传变异情况.结果表明,临床样品经PK15细胞传代后,有3份样品出现细胞病变,经PCR鉴定和测序分析表明,分离获得3株PRV,分别命名为PRVJL03、JL12和JL15株.通过PK15细胞测定分离毒株的病毒滴度分别为106.5、106.5和107.5TCID50/mL.6只家兔分别接种3株分离毒株(103.5 TCID50/只)后均表现为体温升高、注射部位奇痒和四肢麻痹等症状,且于病毒接种后3~4 d全部死亡.3株分离病毒TK、gB、gC、gD和gE基因推导氨基酸序列分析结果表明,与参考毒株相比,分离株TK基因未发生氨基酸变异;gB、gC、gD和gE基因部分位点发生氨基酸缺失、插入或突变,其中gE基因在第48和496位分别存在1个天冬氨酸的插入,与国内报道的流行毒株变异特征一致.遗传进化树分析结果表明,3株分离毒株TK、gB、gC、gD和gE基因与国内2012年以后分离的参考毒株JS-2012和ZJ01等的上述基因均表现出较高的同源性,说明毒株间亲缘关系较近,位于同一分支;与国外分离毒株NIA3和Becker等亲缘关系较远,位于不同的分支;而与国内早期流行的毒株SC和Ea等亲缘关系介于二者之间.本研究成功分离鉴定了 3株PRV变异株,分离毒株对家兔具有较强的致病性,该结果为吉林省PRV流行病学研究提供了新的数据,并为相关后续研究奠定基础.

著录项

  • 来源
    《中国畜牧兽医》 |2021年第5期|1794-1803|共10页
  • 作者单位

    吉林农业大学动物科学技术学院 长春130118;

    吉林农业大学中药材学院 长春130118;

    吉林省梅花鹿生产与产品应用研究室 长春130118;

    吉林农业大学动物科学技术学院 长春130118;

    吉林农业大学动物科学技术学院 长春130118;

    吉林农业大学动物科学技术学院 长春130118;

    吉林农业大学动物科学技术学院 长春130118;

    吉林农业大学动物科学技术学院 长春130118;

    吉林农业大学动物科学技术学院 长春130118;

    吉林农业大学中药材学院 长春130118;

    吉林农业大学中药材学院 长春130118;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 病毒病;
  • 关键词

    猪伪狂犬病毒; 分离鉴定; 遗传变异分析;

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