Oct4、Sox2、c-Myc、Klf4基因慢病毒载体的构建

唐海燕; 沈晓丽; 林立芳; 韩莉莉

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Oct4、Sox2、c-Myc、Klf4基因慢病毒载体的构建

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目的构建Oct4、Sox2、c-Myc、Klf4基因慢病毒表达载体,为诱导性多能干细胞研究奠定基础.方法将Oct4、Sox2、c-Myc、Klf4基因利用Infusion技术重组构建慢病毒载体穿梭质粒pGC-FU-Oct4、pGC-FU-Sox2、pGC-FU-c-Myc、pGC-FU-Klf4,经PCR和测序后与与结构质粒pHelper1.0和包膜质粒pHeiper2.0在脂质体Lipofeetamine2000介导下共转染293T细胞包装生产慢病毒,浓缩纯化后检测滴度.结果 PCR扩增和测序结果证实成功构建Oct4、Sox2、c-Myc、Klf4的慢病毒载体并包装慢病毒,检测Oct4基因重组慢病毒、Sox2基因重组慢病毒、c-Myc基因重组慢病毒的滴度均为1×109TU/mL,Klf4基因重组慢病毒的滴度为1.9×109 TU/mL.结论成功建立重组慢病毒载体的三质拉包装细胞系统.

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来源
《中外医疗》 |2011年第9期|1-3|共3页
作者
唐海燕; 沈晓丽; 林立芳; 韩莉莉;
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作者单位

福建医科大学省立临床医学院,福建省心血管病重点实验室,350001;

福建医科大学省立临床医学院,福建省心血管病重点实验室,350001;

福建医科大学省立临床医学院,福建省心血管病重点实验室,350001;

福建医科大学省立临床医学院,福建省心血管病重点实验室,350001;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类 R346;
关键词
Oct4; Sox2; c-Myc; Klf4; 慢病毒载体;

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