大鼠肝卵圆细胞的增殖模型建立和体外分离培养、诱导分化研究

李铸; 李立; 冉江华; 张升宁; 刘静; 李来邦; 陈娟

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目的建立大鼠肝卵圆细胞(HOC)的增殖模型,探讨分离培养及鉴定HOC的方法.方法采用2-乙酰氨基芴/部分肝切除术刺激建立成体大鼠肝卵圆细胞增殖模型,于肝切除术后第12天切取剩余肝脏,使用胶原酶Ⅳ消化分离和Percoll梯度离心纯化肝卵圆细胞,免疫荧光技术和KT-PCK分析法检测肝卵圆细胞标志物mRNA表达.行体外培养并添加干细胞生长因子(SCF)、肝细胞生长因子(HGF)和表皮生长因子(EGF)诱导其分化.结果分离得到的肝卵圆细胞存活率达到90%,经c-kit免疫荧光显色,PCR 分析显示有CK19和白蛋白mRNA表达.生长因子诱导下有向胆管细胞和肝细胞分化的特性.结论肝卵圆细胞分离纯化及鉴定方法和肝卵圆细胞成功培养,为进一步研究肝干细胞生物学特性和与肝癌的关系提供了物质基础.

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来源
《中国现代医学杂志》 |2010年第5期|663-666671|共5页
作者
李铸; 李立; 冉江华; 张升宁; 刘静; 李来邦; 陈娟;
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作者单位

昆明市第一人民医院(昆明医学院附属甘美医院)肝胆胰一病区,云南昆明,650011;

昆明市第一人民医院(昆明医学院附属甘美医院)肝胆胰一病区,云南昆明,650011;

昆明市第一人民医院(昆明医学院附属甘美医院)肝胆胰一病区,云南昆明,650011;

昆明市第一人民医院(昆明医学院附属甘美医院)肝胆胰一病区,云南昆明,650011;

昆明市第一人民医院(昆明医学院附属甘美医院)肝胆胰一病区,云南昆明,650011;

昆明市第一人民医院(昆明医学院附属甘美医院)肝胆胰一病区,云南昆明,650011;

昆明市第一人民医院(昆明医学院附属甘美医院)肝胆胰一病区,云南昆明,650011;

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正文语种 chi
中图分类医用实验动物学;
关键词
干细胞; 肝卵圆细胞; 细胞分离; 培养; 分化;

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