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TTA1-Tat-PEG-GS NPs结合siRNA-EGFR转染C6细胞抑制EGFR基因表达的研究

         

摘要

目的 探讨TTA1、Tat、聚乙二醇(PEG)修饰的明胶硅氧烷纳米粒子(GS NPs)结合siRNA-EGFR转染C6细胞,抑制其表皮生长因子受体(EGFR)表达的影响.方法 根据鼠EGFR的mRNA序列设计合成siRNA-EGFR以及阴性对照siRNA-Scr(无意义序列).TTA 1-Tat-PEG-GS NPs通过静电作用结合siRNA.实验分4组:Control组、TITA 1-Tat-PEG-GS NPs/siRNA-Scr组、TTA 1-Tat-PEG-GS NPs/siRNA-EGFR组及X-tremeGene/siRNA-EGFR组.除Control组外,其余三组均在体外对C6细胞进行转染.ReM-time PCR、Westem blot分别检测细胞EGFR mRNA及蛋白表达情况;CCK-8法、流式细胞仪分别检测细胞增殖和凋亡情况.结果 与Control组及TTA 1-Tat-PEG-GSNPs/siRNA-Scr组比较,TTA1-Tat-PEG-GS NPs/siRNA-EGFR组在体外细胞水平上能有效抑制C6细胞EGFRmRNA及蛋白的表达(P<0.01),同时抑制C6细胞的增殖(P< 0.05或P<0.01)并促进其凋亡(P<0.01).此外,X-tremeGene/siRNA-EGFR组和TTA 1-Tat-PEG-GS NPs/siRNA-EGFR组在下调C6细胞EGFR水平、抑制细胞增殖及促进细胞凋亡方面差异无统计学意义(P>0.05).结论 TTA1-Tat-PEG-GS NPs可能成为一种新型的基因治疗载体,为胶质瘤基因治疗的进一步研究提供理论依据.

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