过表达Plk-1对gemcitabine诱导的胰腺癌细胞化疗敏感性的影响

余翔; 王兴伟; 李泉; 骆霞岗; 王伟林; 喻春钊

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过表达Plk-1对gemcitabine诱导的胰腺癌细胞化疗敏感性的影响

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目的观察Plk-1基因过表达对gemcitabine诱导胰腺癌细胞AsPC-1化疗敏感性的影响.方法 ①将携带有人外源性Plk-1基因的真核表达质粒转染AsPC-1细胞系设为处理组,转染空载体设为对照组,无处理组设为空白组,转染24h后,提取细胞总RNA和总蛋白,利用RT-PCR法及Western blot鉴定AsPC-1细胞内Plk-1基因和蛋白表达水平.②采用流式细胞术检测转染组细胞凋亡的改变.③不同浓度gemcitabine作用于转染细胞,MTT法测定转染48 h后细胞增殖能力.结果 ①测序结果表明成功的从AsPC-1细胞总RNA中扩增Plk-1基因.RT-PCR结果表明:未转染组AsPC-1细胞组、转染空载体pcDNA3.1组及pcDNA3.1/Plk-1组24 h各组细胞内Plk-1 mRNA相对量分别为(2.14±0.16)、(2.18±0.15)、(2.58±0.18),转染pcDNA3.1/Plk-1组与其他各组相比,差异有高度统计学意义(P＜0.01).Westernblot结果显示:未转染组AsPC-1细胞组、转染空载体pcDNA3.1及pcDNA3.1/Plk-1组24 h各组细胞内Plk-1基因的蛋白表达水平为(0.989±0.018)、(1.022±0.021)、(1.243±0.143),转染pcDNA3.1/Plk-1组与其他各组相比,差异有高度统计学意义(P＜0.01).②在gemcitabine作用下,pcDNA3.1/Plk-1转染组细胞凋亡率明显低于未转染组及空载体转染组,差异有高度统计学意义(P＜0.01).③AsPC-1/Plk-1转染组细胞的生长抑制率亦明显高于未转染组及空载体转染组,差异有高度统计学意义(P＜0.01).结论胞浆过表达Plk-1活性分子可明显降低gemcitabine诱导的AsPC-1细胞凋亡,增强其对化疗药物的耐受性.

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来源
《中国医药导报》 |2013年第36期|4-711|共5页
作者
余翔; 王兴伟; 李泉; 骆霞岗; 王伟林; 喻春钊;
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作者单位

南京医科大学第二附属医院普通外科,江苏南京210011;

南京医科大学第二附属医院普通外科,江苏南京210011;

南京医科大学第二附属医院普通外科,江苏南京210011;

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南京医科大学第二附属医院普通外科,江苏南京210011;

南京医科大学第二附属医院普通外科,江苏南京210011;

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正文语种 chi
中图分类胰腺肿瘤;
关键词
Plk-1基因; 耐药性; Gemcitabine; 胰腺癌;

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