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人骨髓基质干细胞体外定向诱导分化为成骨细胞

         

摘要

目的:探讨人骨髓基质干细胞体外定向诱导成骨细胞的培养方法,为应用人骨髓基质干细胞进行骨科细胞治疗提供依据.方法:抽取入骨髓组织,梯度离心后置于含100ml/L小牛血清的DMEM培养液中,培养24 h换液,待细胞完全贴壁融合长满瓶底后,胰酶消化,传代,换诱导培养基继续培养、扩增.倒置显微镜观察细胞的形态,结合细胞化学染色、免疫组织化学染色进行细胞鉴定,以及采用细胞增殖法(MTT比色试验)分别于1、2、4、6、8 d测细胞OD值,绘制细胞生长曲线.结果:传代细胞4~5 d即可传代,在诱导培养基中2周形成多层结构,并聚集成黑色结节.培养细胞ALP染色强阳性,Ⅰ型胶原免疫组化染色呈黄褐色,细胞在接种后3~6 d增殖最快.结论:本实验方法应用骨髓基质干细胞体外定向诱导所培养的细胞符合成骨细胞的形态特征和生物学特性.

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