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槲皮素的抗炎免疫及部分机制研究

         
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目的 探讨槲皮素抗炎免疫作用及部分机制.方法 采用不同浓度的槲皮素对RAW 264.7细胞进行干预,观察其对RAW 264.7细胞活力的影响,选择对细胞活力无影响浓度的槲皮素以进行下一步研究.以无处理的RAW 264.7细胞为空白组,采用1μg/ml脂多糖(LPS)刺激RAW 264.7细胞建立炎症细胞模型,将其分为模型组,槲皮素0.98、1.95、3.90、7.80 μg/ml剂量组,观察其细胞活力,活性氧(ROS)、单核细胞趋化蛋白1(MCP1)水平.采用环氧合酶(COX)-1、COX-2抑制剂筛选试剂盒检测槲皮素对COX-1、COX-2的抑制作用.另选取SPF级BALB/C雄性小鼠20只(6～8周龄,体重18～22 g)制备其脾淋巴细胞悬液,采用不同浓度的槲皮素对小鼠脾淋巴细胞进行干预,观察其对细胞增殖情况的影响.以无处理的小鼠脾淋巴细胞为对照组,将经LPS(10 μg/ml)或伴刀豆球蛋白A(Con A)(8μg/ml)处理的小鼠脾淋巴细胞分为LPS组、Con A组,以及槲皮素0.98、1.95、3.90、7.80 μg/ml剂量组.观察不同浓度槲皮素对小鼠脾淋巴细胞、Con A诱导的T细胞和LPS诱导的B细胞增殖的影响,观察T细胞中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、γ干扰素(INF-γ)的水平.结果 槲皮素＜7.8 μg/ml时RAW 264.7细胞活力与未处理时比较,差异无统计学意义(P＞0.05).槲皮素0.98、1.95、3.90、7.80 μg/ml剂量组ROS、MCP1含量低于模型组,差异有高度统计学意义(P＜0.01).槲皮素对COX-1、COX-2的IC50分别为12.73、0.44 μg/mL,COX-2与COX-1的IC50比值为0.034.槲皮素浓度为0.98、1.95、3.90、7.80 μg/ml时小鼠脾淋巴细胞增殖均高于未处理时,差异有统计学意义(P＜ 0.05或P＜0.01).槲皮素1.95、3.90、7.80 μg/ml剂量组T细胞低于Con A组,槲皮素3.90、7.80 μgml剂量组B细胞低于LPS组,差异有统计学意义(P＜0.05).槲皮素1.95、3.90、7.80 μg/ml剂量组TNF-α水平均低于Con A组,槲皮素各剂量组IL-6和INF-γ水平均低于Con A组,差异有高度统计学意义(P＜0.01).结论 槲皮素是选择性的COX-2抑制剂,具有良好的抗炎活性,能促进小鼠脾淋巴细胞增殖,抑制T、B细胞增殖和细胞因子的分泌.

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