重组ProTα诱导肝癌细胞自噬的作用及机制

栗华; 高艺萍; 陈观; 吴娜

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目的通过体内外实验探讨ProTα对肝癌细胞自噬和增殖的影响及机制。方法以人肝癌细胞株HepG2为研究对象,给予不同剂量的ProTα和干扰素-γ(IFN-γ)处理,CCK-8法检测ProTα和IFN-γ对HepG2细胞增殖的影响;Western blot法检测HepG2自噬相关LC3B蛋白表达;取C57BL/6雄性小鼠50只,左侧腋下注射H22细胞株复制H22肝癌实体瘤模型,筛选肿瘤直径>2 mm的小鼠40只,随机数表法分为四组,每组各10只,分别为对照组、ProTα组、奥沙利铂组、ProTα+奥沙利铂组。干预组小鼠奥沙利铂腹腔注射2周,对照组小鼠给予等体积生理盐水注射。2周后处死小鼠,取出肿瘤组织,测定小鼠体重、瘤质量并计算抑瘤率;Western blot法检测肿瘤组织中自噬相关LC3B、P62蛋白及p-mTOR蛋白表达水平。结果CCK-8检测显示,与对照组比较,不同浓度的ProTα对HepG2细胞存活率比较,差异无统计学意义(P>0.05);使用100 ng/ml IFN-γ处理HepG2细胞24、48 h的存活率均明显降低,分别为61.03%,52.16%,抑制作用明显,差异有统计学意义(P<0.01);自噬标记物LC3B蛋白水平显著增加,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。动物实验表明,ProTα可明显降低H22实体瘤小鼠的瘤质量系数,抑瘤率达34.7%;ProTα+奥沙利铂组抑瘤率明显高于ProTα组(P<0.05);与对照组及奥沙利铂组比较,ProTα和ProTα+奥沙利铂组胸腺指数较高(P<0.05);与对照组比较,ProTα组、奥沙利铂组和ProTα+奥沙利铂组瘤组织中自噬相关LC3B蛋白的表达显著上调,P62及p-mTOR蛋白表达下调,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论ProTα可以诱导H22荷瘤小鼠肝癌细胞的自噬,主要通过调节免疫细胞释放干扰素IFN-γ等细胞因子并下调p-mTOR表达诱导自噬发挥抗肿瘤作用;并且ProTα可以提高奥沙利铂的抗癌疗效。

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来源
《中国医药科学》 |2022年第19期|25-29|共5页
作者
栗华; 高艺萍; 陈观; 吴娜;
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作者单位

厦门大学附属第一医院消化内科;

福建医科大学临床医学部;

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正文语种 chi
中图分类肝肿瘤;
关键词
肝癌; ProTα; 细胞自噬; 凋亡; 微管相关蛋白轻链3; P-MTOR; 小鼠;

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