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丙泊酚对肾母细胞瘤细胞迁移、侵袭及AMPK/mTOR/4EBP1通路的影响

         

摘要

目的研究丙泊酚对人肾母细胞瘤SK-NEP-1细胞迁移、侵袭的影响以及作用机制。方法对人肾母细胞瘤SK-NEP-1细胞采用不同浓度(0、1μg/ml、2μg/ml、5μg/ml、10μg/ml、20μg/ml)丙泊酚进行干预,药物处理48h,采用MTT法进行筛选后,以5μg/ml丙泊酚作为后续实验剂量。按照AMPK抑制剂Compound C和丙泊酚给药情况,分为空白对照组(C组)、10μmol/L Compound C组(I组)、5μg/ml丙泊酚组(P1组)和10μmol/L Compound C+5μg/ml丙泊酚组(P2组)。采用Transwell法评估SK-NEP-1细胞迁移和侵袭能力,采用蛋白质免疫印迹法检测AMPK、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin,m TOR)和4EBP1及其磷酸化蛋白的表达。结果P1组穿过细胞数和迁移细胞数显著少于C组(P0.05)。与C组相比,P1组中p-AMPK/AMPK蛋白表达显著上调,且p-mTOR/mTOR蛋白和p-4EBP1/4EBP1蛋白表达显著下调(P0.05)。结论丙泊酚可以抑制肾母细胞瘤SK-NEP-1细胞迁移和侵袭,其机制可能与激活AMPK/mTOR/4EBP1信号通路有关。

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