miRNA-18a和miRNA-4802通过自噬抑制淋巴瘤细胞耐药性的机制研究

周仕霞; 李晓明; 唐君玲

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目的研究miRNA-18a和miRNA-4802通过自噬对淋巴瘤细胞耐药性的调控机制。方法以人Burkitt’s淋巴瘤细胞Daudi和人套细胞淋巴瘤细胞JeKo-1为研究对象,阿霉素(ADR)、长春新碱(VCR)为实验药物。以ADR、VCR处理后,采用CCK-8法考察上述2种细胞的相对活性,采用Western blot法检测凋亡标志蛋白活化型胱天蛋白酶9(cleaved caspase-9)和cleaved caspase-6的表达,考察2种细胞对ADR、VCR的耐药性。采用自噬相关蛋白LC3-Ⅱ、p62表达水平检测、自噬流实验和透射电镜观察考察2种细胞自噬活性的差异;采用荧光定量聚合酶链式反应考察2种细胞中miRNA-18a、miRNA-4802及unc-51样激酶(ULK1)、自噬相关蛋白7(ATG7)mRNA的表达差异,并检测ULK1、ATG7蛋白表达差异。再以JeKo-1细胞为研究对象,考察经2种模拟生物体内源的miRNAs(miRNA-18a mimics、miRNA-4802 mimics)处理后,细胞自噬活性和耐药性的变化情况。结果以ADR和VCR处理后,JeKo-1细胞比Daudi细胞具有更强的耐药性和自噬活性。JeKo-1细胞中miRNA-18a、miRNA-4802表达水平均显著低于Daudi细胞,ULK1、ATG7 mRNA和蛋白表达水平均显著高于Daudi细胞(P<0.001)。以miRNA-18a mimics和miRNA-4802 mimics处理JeKo-1细胞后,细胞的自噬活性和耐药性均显著降低。结论miRNA-18a和miRNA-4802可分别通过降低自噬启动基因ULK1和ATG7的表达,抑制淋巴瘤细胞的自噬活性,从而降低淋巴瘤细胞对ADR和VCR的耐药性。

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来源
《中国药房》 |2022年第11期|1330-1337|共8页
作者
周仕霞; 李晓明; 唐君玲;
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作者单位

西南医科大学附属医院血液内科;

西南医科大学附属医院干细胞实验室;

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正文语种 chi
中图分类分子药理学;
关键词
淋巴瘤细胞; 耐药性; miRNA-18a; miRNA-4802; 自噬; 机制;

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