结球甘蓝雌蕊调控转录因子SPT基因的克隆与序列分析

杨朴丽; 许俊强; 刘智宇; 王志敏; 张丹华; 汤青林; 宋明

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以结球甘蓝E1为材料,提取花蕾总RNA,反转录cDNA。根据拟南芥SPT基因设计引物,采用同源克隆的方法从中克隆SPT基因序列1 085 bp,开放阅读框1 062 bp。通过cDNA推导得到的氨基酸序列分析表明,BoSPT编码353个氨基酸残基,预测分子量为37.67 kD,pI为6.83。经过EcoRⅠ和KpnⅠ限制酶双酶切后,构建原核表达质粒pET43.1a-BoSPT转化表达菌株E.coli Rosetta（DE3）,通过SDS-PAGE检测该蛋白的表达。经Smart-embl预测其具有bHLH家族结构域,位于序列第173~221位氨基酸残基处。进化树表明结球甘蓝BoSPT与拟南芥AtSPT和筷子芥AlSPT的亲缘关系较近。BoSPT基因的原核表达得到纯化的融合蛋白。

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来源
《中国蔬菜》 |2013年第20期|24-31|共8页
作者
杨朴丽; 许俊强; 刘智宇; 王志敏; 张丹华; 汤青林; 宋明;
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作者单位

西南大学园艺园林学院;

南方山地园艺学教育部重点实验室;

重庆市蔬菜学重点实验室;

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正文语种 chi
中图分类结球甘蓝;
关键词
结球甘蓝; 雌蕊; SPT; 基因克隆; 序列分析;

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