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动物学——克隆猪主要组织相容性复合体Ⅱ类DR基因座α链和β链及其体外复合体的构建

         

摘要

为推动猪主要组织相容性复合体(MHC)空间构象的研究,体外构建了猪的MHC-Ⅱ类蛋白复合体(SLA-Ⅱ).首先克隆长白-达兰杂交商品猪DRA和DRB基因,用富含甘氨酸-丝氨酸的Linker(G4S)3连接DRA和DRB的胞外区,用SOE—PCR得到复合体基因DRA—linker-DRB,插入原核表达载体进行表达;对表达的融合蛋白进行Western—blot鉴定、纯化、蛋白酶切割并对切割后的蛋白进行分离和纯化.对分离的目的蛋白、融合蛋白及麦芽糖结合蛋白(MBP)进行二级结构测定.

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