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RP11-273G15.2靶向微小RNA-9-5p对肝癌细胞增殖和凋亡的影响

         

摘要

cqvip:目的探讨长链非编码RNA RP11-273G15.2靶向调控微小RNA-9-5p(miR-9-5p)表达及对肝癌细胞增殖和凋亡的影响。方法采用GEPIA分析癌症基因组图谱(TCGA)数据库中269例肝癌组织和50例正常组织的RP11-273G15.2水平;实时定量PCR(qPCR)检测正常人肝细胞HL-7702和肝癌细胞(SMMC-7721、HepG2和BEL-7404)的RP11-273G15.2水平,构建过表达RP11-273G15.2的pcDNA3.1质粒并采用脂质体转染SMMC-7721细胞(过表达组),同时设未行转染的细胞为空白对照组和转染空载pcDNA3.1质粒的阴性对照组。采用qPCR、噻唑蓝(MTT)比色法和Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测RP11-273G15.2水平、细胞活力和凋亡率,qPCR和Western blotting检测凋亡相关因子的表达情况,利用LncBase Predicted v.2在线预测RP11-273G15.2可能结合的下游miRNAs并筛选miR-9-5p为研究目标,构建pGL3荧光素酶报告载体并采用双荧光素酶报告分析系统验证RP11-273G15.2对miR-9-5p的结合能力。结果GEPIA分析结果显示,269例肝癌组织的RP11-273G15.2水平低于50例正常组织(P0.05)。结论肝癌组织和细胞中RP11-273G15.2低表达且发挥抑癌作用,上调其水平可抑制增殖并诱导凋亡,可能与靶向miR-9-5p有关,RP11-273G15.2/miR-9-5p轴在肝癌治疗中有一定潜能。

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