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人参皂苷Rd抑制人非小细胞肺癌A549细胞的生长及作用机制

         

摘要

目的探讨人参皂苷Rd(GS-Rd)对人非小细胞肺癌(NSCLC)细胞株A549细胞增殖、凋亡、侵袭和周期的影响及可能机制。方法采用MTT法,观察不同浓度(12.5、25、50、100μmol/L)GS-Rd体外作用NSCLC细胞系A549不同时间后对其细胞活力的影响;利用高内涵分析软件,观察不同浓度、不同时间作用于A549细胞系的荧光强度以评估其对细胞凋亡的影响;采用Transwell法观察不同浓度GS-Rd对A549细胞侵袭能力的影响;利用流式细胞仪检测A549细胞周期的阻滞效应;Western blotting检测经GS-Rd处理后A549细胞周期相关蛋白的表达情况。结果MTT法结果显示,12.5、25、50、100μmol/L GS-Rd处理A549细胞后的24 h增殖抑制率分别为3.54%、18.25%、26.58%和32.38%,48 h增殖抑制率分别为21.91%、27.15%、40.37%和46.44%。随着药物浓度的增加,其增殖抑制率也随之增加,呈剂量-时间依赖性(P<0.05)。高内涵分析显示,GS-Rd对细胞亦具有明显的促凋亡作用,且呈剂量-时间依赖性。Transwell小室结果显示,12.5、25、50μmol/LGS-Rd作用A549细胞后的穿膜细胞数分别为(78.2±16.32)个、(57.0±10.37)个和(42.8±15.98)个,空白组为(89.8±12.87)个。与空白组比较,GS-Rd组的细胞侵袭数目明显减少,并呈浓度依赖性(P<0.05)。流式细胞仪检测结果显示,与空白组比较,GS-Rd作用A549细胞24 h后,出现G_(0)/G_(1)期细胞比例逐渐上升,而S期细胞比例逐渐下降,细胞周期阻滞于G_(0)/G_(1)期。Western blotting检测结果显示,磷酸化Akt表达下降,且p21、p27表达上升。结论GS-Rd可直接抑制NSCLC细胞系A549的增殖,亦可通过阻滞细胞周期于G_(1)期抑制细胞增殖,且降低了A549细胞系的侵袭能力。

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