• 主题
高级搜索  >
历史搜索 清空历史
首页> 中文期刊> 《中国全科医学》 >周期素依赖性蛋白激酶5过度活性与肾小球足细胞凋亡的关系研究

周期素依赖性蛋白激酶5过度活性与肾小球足细胞凋亡的关系研究

页面导航
  • 摘要
  • 著录项
  • 相似文献
  • 相关主题

摘要

Objective To study the influence of Cdk5 activity on the structure and function of glomerulus podocyte by transfection of p25 gene. Methods In 2014,differentiated and mature isolated mouse podocytes were cultured in RPMI 1640 medium with 10% fetal bovine serum and divided into three groups including control group,empty group and p25 group. p25 gene was cloned through the pAdTrack-CMV viral vector,and transfected into podocytes. After 48 hours,cells were collected for further analysis. Cdk5,p25,p35,Cleaved caspase3 expressions were detected by Western blotting method;Cdk5 activity were tested through immunoprecipitation and isotope γ-32 P marking methods. In order to observe the expression of Cdk5,p35 and structure of Actin in podocyte,immunofluorescent staining were conducted. Results Cak5 in HEK293 cells had positive expression while p35 had negative expression;there were different levels of Cdk5 and p35 in renal cortex,podocyte and glomerulus. p25 had negative expression in control group and empty group while positive expression in p25 group. As for the expression levels of Cleaved caspase3 and Cdk5 activity in different groups,differences were of statistical significance( P <0. 05);the expression levels of Cleaved caspase3 and Cdk5 activity in p25 group was higher than those in the other two groups (P < 0. 05). In p25 group,Actin within podocyte were arranged in disorder and forms of cells were abnormal,while those conditions were on the contrary in the other two groups. Conclusion p25 causes overactivation of Cdk5 and induces podocyte morphological change,Actin arrangement disorder and cell apoptosis. Therefore,Cdk5 activity plays an important role in maintaining normal structure and function of podocyte.%目的：通过在肾小球足细胞中转染 p25基因，探讨周期素依赖性蛋白激酶5（Cdk5）的活性对足细胞结构及功能的影响。方法2014年度，于含10%胎牛血清的 RPMI 1640培养液中培养分化成熟的小鼠离体足细胞，将足细胞分为对照组、空转染组和 p25转染组。应用 pAdTrack-CMV 病毒载体克隆 p25基因，并转染足细胞，48 h 收集细胞；采用 Western blotting 法测定 Cdk5、p25、p35及细胞凋亡相关蛋白 Cleaved caspase3的表达水平；应用免疫沉淀和同位素γ-32 P 标记法测定 Cdk5活性；足细胞免疫荧光化学染色，观察 Cdk5、p35在足细胞中的表达，以及足细胞 Actin的排列情况。结果 HEK293细胞 Cdk5表达阳性，p35表达阴性，肾脏皮质、足细胞和肾小球中均有不同程度的 Cdk5和 p35的表达。对照组和空转染组 p25表达阴性，p25转染组 p25表达阳性。各组细胞凋亡相关蛋白 Cleaved caspase3表达水平和 Cdk5活性比较，差异有统计学意义（P <0.05）；其中 p25转染组细胞凋亡相关蛋白 Cleaved caspase3表达水平和 Cdk5活性高于对照组和空转染组（P <0.05）。p25转染组足细胞内 Actin 排列紊乱，细胞形态发生异常改变，对照组和空转染组细胞内 Actin 排列正常，细胞形态没有发生改变。结论 p25引起 Cdk5过度活性可致肾小球足细胞形态改变，Actin 排列紊乱，诱发细胞凋亡。因此，Cdk5的活性在维持足细胞正常结构和功能方面发挥重要作用。

著录项

  • 来源
    《中国全科医学》 |2016年第23期|2793-2797|共5页
  • 作者

    陆晓华; 毕逢辰; 郑亚莉; 张霞; 李博; 保莉; 罗红艳; 曹丽; 鄂静; 张彬;

  • 作者单位

    750021 宁夏银川市;

    宁夏回族自治区人民医院 西北民族大学医学院第一附属医院肾内科;

    750021 宁夏银川市;

    宁夏回族自治区人民医院 西北民族大学医学院第一附属医院肾内科;

    750021 宁夏银川市;

    宁夏回族自治区人民医院 西北民族大学医学院第一附属医院肾内科;

    750021 宁夏银川市;

    宁夏回族自治区人民医院 西北民族大学医学院第一附属医院肾内科;

    750021 宁夏银川市;

    宁夏回族自治区人民医院 西北民族大学医学院第一附属医院肾内科;

    750021 宁夏银川市;

    宁夏回族自治区人民医院 西北民族大学医学院第一附属医院肾内科;

    750021 宁夏银川市;

    宁夏回族自治区人民医院 西北民族大学医学院第一附属医院肾内科;

    750021 宁夏银川市;

    宁夏回族自治区人民医院 西北民族大学医学院第一附属医院肾内科;

    750021 宁夏银川市;

    宁夏回族自治区人民医院 西北民族大学医学院第一附属医院肾内科;

    宁夏医科大学研究生学院;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 R322.61;
  • 关键词

    足细胞; 细胞周期蛋白依赖激酶 5; p35; p25; 细胞凋亡;

相似文献

  • 中文文献
  • 外文文献
  • 专利

客服邮箱：kefu@zhangqiaokeyan.com

京公网安备：11010802029741号 ICP备案号：京ICP备15016152号-6 六维联合信息科技 (北京) 有限公司©版权所有

  • 客服微信

  • 服务号