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八肋游仆虫γ微管蛋白cDNA序列及其在大肠杆菌中的表达

         

摘要

提取八肋游仆虫(Euplotes octocarinatus)的mRNA,采用RT-PCR技术对其γ微管蛋白基因的cDNA序列进行了分析.结果表明八肋游仆虫的微管蛋白编码基因至少使用4个转录起始位点, 分别位于起始密码子前的32、29、24和20bp处;该基因同时也有至少4多聚腺苷酸加尾位点,分别位于终止密码子后的21、23、29和32 bp处.由于多个转录起始位点和多聚腺苷酸加尾位点的存在,对应的mRNA长度在1427~1450 核苷酸之间.此外,本研究对该基因中编码半胱氨酸的TGA密码子进行定点突变,然后在大肠杆菌中进行异体表达, SDS-PAGE分析表明表达产物为92kDa的γ微管蛋白融合蛋白.

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