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原子力显微镜对角质形成细胞与黑素细胞共培养模型的观察研究

         

摘要

目的:用原子力显微镜观察人表皮黑素细胞(MC)、角质形成细胞(KC)单独培养和共培养的表面形态以及α-促黑素(α-MsH)对细胞表面形态的影响.方法:分别纯化培养来自人包皮的表皮MC和KC,MC以自配的添加MC生长物质的MCDB153培养基培养,KC以KC无血清培养基(K-SFM)常规培养.传第2代后以1:10的比例将两细胞接种到3cm × 3cm的小培养皿中,以K-SFM培养基继续培养,单独或混合培养的细胞经添加合或不舍100nM α-MSH的培养基干预3天后,0.5%戊二醛固定10min,原子力显微镜常温常压下,触模式扫描.结果:正常人表皮MC有3个树突,每个树突有明显的二级分枝,除主干和分支见到膨出的颗粒物质,我们在树突的侧缘底侧和顶端还发现有丝状伪足结构,经α-MSH刺激后树突明显变长、变细,主干和分支表面膨出颗粒物质更为密集,许多已脱离枝干,丝状伪足则未有明显变化.表皮KC表面可见许多片状或钩状突起.共培养后,KC与MC接触部位可见明显的丝状伪足样结构,未连接部位则未见到丝状伪足样结构,添加α-MSH后,两细胞连接处的丝状伪足样结构明显增多.结论:通过胞吐和丝状伪足输送可能是黑素小体从MC向KC传递的两种主要方式,α-MSH可能通过促进这两种结构的发生而发挥促黑素传递的作用.

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