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左卡尼汀对高糖诱导雪旺细胞凋亡的影响

         

摘要

目的探讨左卡尼汀对高糖诱导雪旺细胞凋亡的影响。方法将体外培养的细胞株RSC96以1.5×10~4个/ml的密度接种于96孔培养板(200μl/孔)或以2×10~5个/ml的密度接种于6孔培养板(2 ml/孔),培养24 h。采用随机数字表法,将其分为4组(n=24):正常对照组(C组)、高糖组(H组)、高糖+左卡尼汀组(H+L组)和甘露醇渗透压对照组(M组)。C组于含5.6 mmol/L.葡萄糖的正常培养基中孵育;H组于含50 mmol/L葡萄糖的培养基中孵育;H+L组于含50 mmtol/L葡萄糖和终浓度为50μmol/L左卡尼汀的培养基中孵育;M组于含5.6 mmol/L葡萄糖和44.4 mmol/L甘露醇的培养基中孵育。于孵育48 h时,倒置显微镜下观察细胞生长情况,采用黄嘌呤氧化酶法测定SOD的活性,硫代巴比妥酸法测定MDA的含量,MTT法测定细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blot法检测活化的半胱氨酸天冬氨酸酶3(caspase-3)以及多聚腺苷酸二磷酸-1(PARP-1)蛋白表达。结果与C组比较,H组和H+L组细胞活力和SOD活性降低,细胞凋亡率和MDA含量升高,活化的caspase-3和PARP-1蛋白表达上调(P<0.05),M组上述各指标差异无统计学意义(P>0.05);与H组比较,H+L组细胞活力和SOD活性升高,细胞凋亡率和MDA含量降低,活化的caspase-3和PARP-1蛋白表达下调(P<0.05)。结论左卡尼汀可减轻高糖诱导雪旺细胞的凋亡,其机制与抑制氧化应激反应,从而下调活化的caspase-3和PARP-1的表达有关。

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