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GSK126对犬乳腺肿瘤细胞上皮间质转化的影响

         

摘要

探讨Zeste基因增强子同源物2(enhancer of Zeste homolog 2,EZH2)抑制剂GSK126对犬乳腺肿瘤细胞增殖、迁移、凋亡及上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的影响。取对数生长期的犬乳腺肿瘤细胞(canine mammary tumor cells,CHMm cells),将不同浓度的EZH2抑制剂GSK126(0、10、20、40μmol·L^(-1))作用于体外培养CHMm细胞后,培养48 h,采用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)和细胞克隆形成试验检测细胞增殖能力,Transwell法检测细胞迁移能力变化,Annexin V-FITC/PI流式细胞仪检测细胞凋亡能力,qRT-PCR和Western blot方法检测CHMm细胞中凋亡相关因子Bcl-2和Bax、上皮间质标志物E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、EZH2 mRNA和蛋白相对表达量。结果显示:与对照组相比,GSK126对CHMm细胞的增殖及迁移具有明显抑制作用,呈明显的剂量依赖性;与对照组相比,不同浓度GSK126处理组的凋亡率明显升高;GSK126处理后促凋亡因子Bax、上皮标志物E-cadherin mRNA和蛋白相对表达量均显著升高,抗凋亡因子Bcl-2、间质标志物N-cadherin、Vimentin和EZH2 mRNA和蛋白相对表达量均明显降低。EZH2抑制剂GSK126可通过抑制犬乳腺肿瘤细胞的增殖、迁移、EMT和诱导细胞凋亡,从而抑制犬乳腺肿瘤细胞发展进程,为犬乳腺肿瘤治疗提供理论基础。

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