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新城疫病毒F蛋白在水稻中的表达及检测

         

摘要

To develop rice-derived subunit vaccine of Newcastle disease (ND),NDV F gene was screened,designed and synthesis after clone and construct recombinant plasmid pCAMBIA1300-F according to rice preference codon optimization.By constructing of vector twice,we made the target gene connect with vector pMP3,then transferred the gene to the vector pCAMBIA1300,finally Agrobacterium tumefaciens would be a mediate witch lead the gene to rice callus.The expressed rice seeds were got after screening by hygromycin.To obtain high expression of homozygous strain,the real time PCR were used to select 5 homozygous lines.The test of NDV-F antigen strip and Western blot indicated that the recombinant protein could react with good antigenic activity.This research would lay the foundation of the rice vaccine research.%旨在研究水稻表达新城疫病毒F蛋白,制备亚单位疫苗.根据GenBank中的新城疫病毒F基因序列以及水稻偏爱性密码子筛选、优化并合成F基因,通过两次载体构建,先使目的基因连在中间载体pMP3上,再连接到pCAMBIA1300植物载体上,通过农杆菌导入水稻愈伤组织中,经过潮霉素抗性筛选,获得表达植株.通过QPCR的方法筛选获得高表达的纯合子株系5株.新城疫抗原试纸条检测和Western blot检测确定F蛋白具有良好的反应原性.本试验为家禽传染病的植物性水稻疫苗研究奠定了基础.

著录项

  • 来源
    《畜牧兽医学报》 |2017年第6期|1167-1172|共6页
  • 作者单位

    河南农业大学牧医工程学院,郑州450002;

    河南农业大学牧医工程学院,郑州450002;

    河南省农业科学院动物免疫学重点实验室,农业部动物免疫学重点实验室,河南省动物免疫学重点实验室,郑州450002;

    河南农业大学牧医工程学院,郑州450002;

    河南农业大学牧医工程学院,郑州450002;

    河南省农业科学院动物免疫学重点实验室,农业部动物免疫学重点实验室,河南省动物免疫学重点实验室,郑州450002;

    河南省农业科学院动物免疫学重点实验室,农业部动物免疫学重点实验室,河南省动物免疫学重点实验室,郑州450002;

    河南省农业科学院动物免疫学重点实验室,农业部动物免疫学重点实验室,河南省动物免疫学重点实验室,郑州450002;

    郑州大学生命科学学院,郑州450001;

    河南省农业科学院动物免疫学重点实验室,农业部动物免疫学重点实验室,河南省动物免疫学重点实验室,郑州450002;

    河南农业大学牧医工程学院,郑州450002;

    河南农业大学牧医工程学院,郑州450002;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 基因工程的应用;
  • 关键词

    新城疫病毒; F基因; 植物表达载体; QPCR; 纯合子;

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