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用RT-PCR检测海兰褐蛋鸡禽戊型肝炎病毒

         

摘要

为证实我国蛋鸡群中存在禽戊型肝炎病毒(hepatitis E virus,HEV),从患有大肝大脾病的某海兰褐蛋鸡群采集粪便样品40份、血浆样品10份.提取RNA后,进行禽HEV ORF2基因片段的RT-PCR(reverse transcription PCR)检测,阳性样品进行克隆测序.同时采集疑似HEV感染鸡的肝,在两周龄SPF鸡进行了人工接种试验.结果表明,来自海兰褐蛋鸡群的40份粪便和10份血浆样品中,27份粪便样品和4份血浆样品为禽HEV RNA阳性.随机选取两个阳性样品的序列进行分析,其与国内外参考序列相似性为78.1%~98.3%.进化树分析显示与中国、欧洲参考株在同一分支,属于禽HEV基因3型.人工接种试验结果显示,接种后14 d的SPF鸡肝中均鉴定出HEV RNA阳性(4/4).我国蛋鸡群存在基因3型禽HEV.本研究首次发现并报道国内蛋鸡存在禽HEV,这为进一步了解禽HEV在我国鸡群的流行状况及其危害提供了依据.

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