转PRL基因小鼠遗传性状分析

任艳萍; 谢亮亮; 李海艳; 石德顺; 李湘萍

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转PRL基因小鼠遗传性状分析

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本研究以原核注射法生产的乳腺特异性表达PRL基因小鼠为模型,从外源基因遗传完整性、拷贝数和插入位点3方面对其进行遗传性状分析,为今后大型转基因动物的选育提供基础.采用基因组DNA PCR方法筛选发生外源基因片段部分缺失的小鼠,并进行Southern blot验证,以检测外源基因的遗传完整性;用绝对荧光定量PCR方法测定外源基因拷贝数,用Genome walking方法分析外源基因整合位点.结果显示,外源基因片段部分缺失率为1.91％;整合十几个拷贝外源基因的小鼠在便携UV灯下可见绿色荧光,整合2个拷贝的小鼠无绿色荧光;在NW 001073945.1序列的2 025～2 026 bp和NW 001030574.1序列的10 760 020～10 760 021 bp处插入的外源基因可正常表达.以上结果说明,外源PRL基因在原核注射法生产的转基因小鼠中可稳定遗传;在一定范围内,外源基因的表达量与拷贝数呈正相关;附近无其他基因的外源基因插入位点有利于外源基因的表达.

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来源
《畜牧兽医学报》 |2016年第9期|1861-1867|共7页
作者
任艳萍; 谢亮亮; 李海艳; 石德顺; 李湘萍;
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作者单位

广西大学亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室,南宁530004;

遵义医学院基础医学院,遵义563003;

广西大学亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室,南宁530004;

广西大学亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室,南宁530004;

广西大学亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室,南宁530004;

广西大学亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室,南宁530004;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类 S865.13;
关键词
转基因动物; 遗传性状; 原核注射; 外源基因插入位点; 拷贝数;

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