共表达猪IFN-γ基因对PPV VP 2-PCV ORF2真核质粒的分子免疫佐剂效应研究

陈燕凌; 徐志文; 郭万柱; 朱玲; 徐凯; 唐玉香

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将干扰素-γ、猪圆环病毒Ⅱ型ORF2主要抗原表位(47-85位AA)和猪细小病毒VP2基因克隆至pCI-neo真核载体中,构建重组质粒pCI-IFN-γ.ORF2.VP2.用脂质体介导法将其转染到MDBK细胞中,利用RT-PCR和间接免疫荧光法检测产物的表达情况.将重组质粒pCI-IFN-γ.ORF2.VP2、pCI-ORF2.VP2、对照质粒pCI-neo、PBS、猪细小病毒火活苗和猪圆环病毒亚单位疫苗通过肌肉注射免疫小鼠,检测小鼠不同时期的淋巴细胞转化功能、T淋巴细胞亚群动态变化情况以及PPV、PCV2抗体水平.试验结果显示,在转染重组质粒的MDBK细胞中能扩增到ORF2-VP2和IFN-γ基因;转染后48 h用间接免疫荧光法能在荧光显微镜下观察到绿色荧光,检测到特异性蛋白的表达.pCI-IFN-γ.ORF2.VP2免疫组从第7天开始脾淋巴细胞对ConA有明显反应,显著高于对照组和PCI-ORF2.VP2免疫组;CD3+CD4+、CD3+CD8+T淋巴细胞的数量高于或显著高于对照组和pCI-ORF2.VP2免疫组;在免疫后第14天检测到PPV PCV抗体.结果表明,pCI-IFN-γ.ORF2.VP2能够有效诱导机体产生细胞免疫和体液免疫.

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来源
《畜牧兽医学报》 |2010年第10期|1274-1280|共7页
作者
陈燕凌; 徐志文; 郭万柱; 朱玲; 徐凯; 唐玉香;
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作者单位

四川农业大学动物生物技术中心,动物疫病与人类健康实验室,雅安,625014;

四川农业大学动物生物技术中心,动物疫病与人类健康实验室,雅安,625014;

四川农业大学动物生物技术中心,动物疫病与人类健康实验室,雅安,625014;

四川农业大学动物生物技术中心,动物疫病与人类健康实验室,雅安,625014;

四川农业大学动物生物技术中心,动物疫病与人类健康实验室,雅安,625014;

四川农业大学动物生物技术中心,动物疫病与人类健康实验室,雅安,625014;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类 S852.659.2;
关键词
猪细小病毒; VP2基因; 猪圆环病毒; ORF2基因; IFN-γ基因;

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