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不同培养条件对牛精原干细胞增殖的影响与特性鉴定

         
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摘要

探索血清浓度以及干细胞因子(SCF)、白血病抑制因子(LIF)、胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)对牛精原干细胞体外增殖的影响,并对其进行鉴定.试验1:以高糖DMEM为基础培养液,添加浓度为0%、2.5%、5%和10%的胎牛血清(Fetal bovine serum,FBS),分为4个试验组.结果表明,血清浓度影响牛精原干细胞的体外增殖,添加2.5%的FBS比较合适.试验2:培养液中加入不同浓度的SCF、LIF及GDNF,可增加精原干细胞的数量,其中加入20 μg/L SCF、80 μg/L GDNF、10 μg/L LIF后,与对照组比较能显著提高精原干细胞数(P＜0.05).采用碱性磷酸酶染色、细胞免疫组织化学染色和RT-PCR对牛精原干细胞进行鉴定,结果碱性磷酸酶染色呈弱阳性;细胞免疫组织化学染色Integrin β1阳性、c-kit阳性;经RT-PCR扩增,获得了120 bp的Gfrα1序列和280 bp的c-kit序列,与预期的产物大小一致.因此,培养液中添加2.5%FBS、20 μg/L SCF、80 ng/mL GDNF、10 μg/L LIF 对精原干细胞的增殖有利.

著录项

  • 来源
    《畜牧兽医学报》 |2007年第6期|542-547|共6页
  • 作者

    张仕强; 毕聪明; 彭树英; 吕宁; 张涌;

  • 作者单位

    西北农林科技大学生物工程研究所,杨凌,712100;

    西北农林科技大学生物工程研究所,杨凌,712100;

    锦州医学院畜牧兽医学院,锦州,121000;

    西北农林科技大学生物工程研究所,杨凌,712100;

    西北农林科技大学生物工程研究所,杨凌,712100;

    西北农林科技大学生物工程研究所,杨凌,712100;

  • 原文格式 PDF
  • 正文语种 chi
  • 中图分类 S823.2;
  • 关键词

    精原干细胞; SCF; LIF; GDNF; 牛;

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