首页> 中文期刊> 《畜牧兽医学报》 >表达新城疫病毒HN基因的重组火鸡疱疹病毒的构建

表达新城疫病毒HN基因的重组火鸡疱疹病毒的构建

         

摘要

应用聚合酶链反应(PCR)技术,用设计带有限制性酶切位点的特异地扩增了从起始密码子开始的1.8kb新城疫病毒(NDV)血凝素-神经氨酸(HN)基因开放式阅读框(ORF),然后插入pTK2B的Nhe I位点,构建了含NDV HN基因的插入载体pTK HN1和pTK HN2,将其与感染火鸡疱疹病毒(HVT)细胞的总DNA共转染鸡胚成纤维细胞(CEF),经有限稀释法和Dot-blot筛选,得到含有HN基因的重组体rHVT1和rHVT2.对重组体进行组织培养传代和Western blot分析,表明重组体在感染细胞中表达了HN蛋白,重组体在CEF上的生长特性与亲本病毒相同,且在连续传代过程中保持稳定.

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