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牛卵母细胞皮层颗粒荧光染色法质成熟鉴定

         

摘要

以皮层颗粒(CG)单层分布于质膜下做为卵母细胞质成熟的指标,利用CG荧光染色法,研究了不同类型牛卵母细胞的质成熟情况.结果表明:(1)采自直径大于5mm、2~5mm和小于2mm卵泡的卵母细胞,成熟培养前的质成熟率分别为4.2%、1.8%和0,三者间无显著差异.但所有的大卵泡卵以及95.2%的中卵泡卵,CG已分布于皮层,而小卵泡卵中则有51.7%的卵子,CG尚未迁移至皮质区,仍以簇的形式分布于细胞质的中间.经24h成熟培养后,三类卵子的质成熟率分别达到54.5%、28.6%、和7.1%,三者间存在显著差异(P<0.05).小卵泡卵内的CG趋向于聚集成更大的簇,并向皮质区迁移.(2)根据卵丘细胞情况而分的四类卵母细胞:A(带有5层以上致密卵丘细胞)、B(带有3~5层致密卵丘细胞)、C(裸卵或半裸卵)和D(卵丘细胞已扩散成蜘蛛网状),成熟培养前的质成熟率分别为4.3%、0、0和28.0%,第四者显著高于前三者(P<0.01).成熟培养后,A、B类卵子的质成熟率(23.1%和10.8%)显著低于D类卵子(88.2%)(P<0.01).裸卵表现为完全缺乏CG或形态异常.(3)采卵结果表明,大、中、小卵泡卵中,A类卵子所占的比例依次减少(97.7%、56.3%和18.4%),B类卵子依次增多(2.3%、36.6%和52.0%).结合上述结果可见,卵泡大小与卵丘细胞多少具有相关性,大、中、小卵泡卵质成熟率依次降低与多卵丘细胞卵的质成熟率高于少卵丘细胞卵的结果是统一的.

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