猪肺炎支原体P97蛋白单克隆抗体的制备、表位鉴定及其初步应用

王宁; 谨瑾; 刘璐; 刘欢欢; 姜立波; 辛九庆; 刘恒贵

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cqvip:为了制备能够用于阻断ELISA检测的猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp)单克隆抗体(MAb),本研究将原核表达的Mhp J株P97蛋白C末端包含R1区的肽段(P97CR1)作为免疫原免疫BALB/C雌鼠,筛选获得一株能稳定分泌抗Mhp P97蛋白MAb的杂交瘤细胞株A3。鉴定结果显示,A3 MAb是IgG1亚类,轻链为κ链。Western blot结果显示A3 MAb能够和原核表达纯化的P97CR1蛋白特异性反应,并且在流式细胞仪分析中能够识别天然的Mhp。通过逐渐截短表达分析该MAb识别的表位序列为LDDNLQ,该抗原表位在Mhp菌株中高度保守。阻断ELISA初步试验结果显示,A3 MAb与蛋白抗原的结合能够被Mhp高免阳性血清阻断。该MAb的制备为进一步建立特异性强、灵敏度高的Mhp阻断ELISA检测方法奠定了基础。

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来源
《畜牧兽医学报》 |2020年第5期|1110-1118|共9页
作者
王宁; 谨瑾; 刘璐; 刘欢欢; 姜立波; 辛九庆; 刘恒贵;
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作者单位

中国农业科学院哈尔滨兽医研究所动物支原体病创新团队哈尔滨150069;

齐齐哈尔市动物卫生监督所齐齐哈尔161000;

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正文语种 chi
中图分类霉形体（支原体）;
关键词
猪肺炎支原体; 单克隆抗体; P97蛋白; 表位鉴定;

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