黄芪多糖降低脂多糖对鸡巨噬细胞促炎细胞因子和TLRs mRNA转录水平影响的效应分析

刘倩; 李大鹏; 张宏; 刘琴; 王学智; 李建喜; 杨孝朴; 张景艳

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黄芪多糖(APS)调节天然免疫的作用已被广为认知,但有关APS对鸡巨噬细胞(HD11)调节作用及其分子机制的研究报道鲜少。本试验以脂多糖(LPS)诱导损伤的HD11细胞为研究模型,旨在评价APS对HD11抵御LPS刺激损伤的保护作用及对信号通路中敏感TLRs mRNA转录水平的影响。采用CCK-8法确定LPS诱导细胞炎症损伤模型的最适浓度和APS最适工作浓度;结合显微观察、一氧化氮(NO)检测和乳酸脱氢酶(LDH)检测评价APS对LPS诱导损伤HD11细胞的干预作用;采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)方法检测APS对LPS诱导损伤HD11细胞的炎性细胞因子及TLR1、TLR2、TLR4、TLR15 mRNA表达的调节作用。结果表明:当LPS浓度>9.76μg·mL^(-1)时,在2%鸡血清+1%双抗的完全培养液中培养的HD11细胞的增殖活力显著下降,且细胞的炎症损伤变化明显。当APS浓度>50μg·mL^(-1)时,HD11细胞增殖活性持续上升,其添加剂量与细胞增殖活性呈正相关性。100μg·mL^(-1)APS能显著提高HD11细胞中NO、LDH的释放(P<0.05),但极显著(P<0.01)、显著(P<0.05)降低9.76μg·mL^(-1)LPS诱导损伤HD11细胞中NO、LDH的释放;其能显著提高HD11细胞促炎因子(IL-1β、TNF-α及iNOS)mRNA水平(P<0.05),极显著抑制IL-10 mRNA水平(P<0.01),但能极显著抑制LPS损伤HD11细胞中IFN-α、TNF-α、IL-10 mRNA水平的升高(P<0.01),显著降低LPS诱导损伤HD11细胞中IL-6、IL-1β、iNOS mRNA的升高(P<0.05)。100μg·mL^(-1)APS能极显著降低HD11细胞TLR2、TLR4及TLR15 mRNA转录水平(P<0.01),极显著抑制LPS诱导损伤HD11细胞TLR2 mRNA转录水平升高(P<0.01),可极显著(P<0.01)、显著(P<0.05)降低LPS诱导损伤HD11细胞TLR4、TLR15 mRNA转录水平,但对HD11细胞和LPS诱导损伤HD11细胞TLR1 mRNA转录水平均无明显作用。综上可知,APS对HD11细胞的安全浓度范围大,可通过调节TLR2、TLR4及TLR15 mRNA水平,降低LPS诱导损伤HD11细胞过度炎症反应,发挥免疫双向调节作用。

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来源
《畜牧兽医学报》 |2022年第9期|3251-3261|共11页
作者
刘倩; 李大鹏; 张宏; 刘琴; 王学智; 李建喜; 杨孝朴; 张景艳;
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作者单位

甘肃农业大学动物医学院;

中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所;

河北农业大学中兽医学院;

甘肃省兽药饲料监察所;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类中兽医药理学;
关键词
黄芪多糖; 鸡巨噬细胞; 炎症因子; TLRs; 免疫调节;

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