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牛乳铁蛋白对脂多糖体外诱导大鼠空肠上皮细胞炎症的抑制作用及机制

摘要

目的探讨牛乳铁蛋白(bLF)在体外对大鼠空肠上皮细胞株(IEC-6)细胞增殖和对脂多糖(LPS)诱导的细胞炎性反应的影响及机制。方法体外培养IEC-6细胞,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测不同浓度bLF时IEC-6细胞的活性,5-溴脱氧尿苷(Brdu)标记检测bLF对细胞增殖能力的影响,荧光定量PCR及酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的mRNA水平,Western blot检测bLF对LPS诱导的炎症信号通路中丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)及核因子-κB(NF-κB)水平。结果bLF在体外可促进IEC-6细胞活性和增生能力,并呈浓度依赖效应(F=3.825、5.861,均P〈0.05),当处理质量浓度为100 mg/L时,IEC-6细胞活性和增殖能力逐渐增强(q=5.240、3.765,均P〈0.05)。应用100 mg/L质量浓度的bLF预处理IEC-6细胞可明显降低IL-1β、IL-6及TNF-α 的mRNA表达水平(q=14.28、10.12、16.45,均P〈0.001),并降低IL-6和TNF-α蛋白的表达(q=15.06、6.74,均P〈0.001)。与单独LPS组相比,应用100 mg/L质量浓度的bLF预处理IEC-6细胞可使MAPK/NF-κB通路的激活水平下降(q=12.96、18.54,均P〈0.001)。结论bLF在体外可促进大鼠IEC-6细胞活性及增殖能力,并通过抑制MAPK/NF-κB信号通路起到抑制LPS诱导的炎性反应的作用。

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