链霉菌M1033D—木糖异构酶的分子克隆

朱学良; 王玉珍

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链霉菌M1033染色体DNA经BamH Ⅰ酶解后电泳,Southern转移。根据自测的链霉菌ML033 D-木糖异构酶氨基酸序列设计合成寡聚核苷酸探针X-2、X-3,以X-2、X-3及Ampullariella sp3876 D-木糖异构酶基因(1.17kb)为探针进行杂交,确定与上述探针杂交最强处在15kb左右。从胶上分离出9—20kb大小的片段,克隆到EMBL 3载体中,经杂交筛选后,得到0.6%的阳性噬斑,其插入大小为13kb。将插人DNA的Sal Ⅰ酶解片段(2.5kb)进一步亚克隆于pUC18,得到重组质粒pUB 1,经酶解图谱、部分序列分析和互补实验确定pUB1含有完整的M1033

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来源
《生物工程学报》 |1992年第3期|232-236|共5页
作者
朱学良; 王玉珍;
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作者单位

不详;

不详;

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原文格式 PDF
正文语种 CHI
中图分类转化及克隆;
关键词
克隆; 链霉菌; 木糖异构酶;

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