聚赖氨酸修饰丝素蛋白膜对神经干细胞生长和分化的影响

赵晓阳; 邓立志; 邓宇斌; 万勇; 张黎明

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聚赖氨酸修饰丝素蛋白膜对神经干细胞生长和分化的影响

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利用聚赖氨酸修饰丝素蛋白膜,观察其对神经干细胞(NSCs)生长及分化的影响,为中枢神经系统损伤修复材料的选择提供实验基础和理论依据.文中首先制备聚赖氨酸修饰的丝素蛋白膜,并通过核磁共振图谱和紫外-可见光谱进行验证.NSCs分别接种在单纯丝蛋白膜(Silk)、聚赖氨酸修饰的丝蛋白膜(Silk-PIL)和多聚赖氨酸(PLL)上进行培养,分别在1、3、5、7d时用CCK-8检测NSCs增殖活性.在第7天时,用免疫荧光染色检测NSCs分化情况,Western blotting和TUNEL检测细胞凋亡水平,Real-time PCR检测脑源性神经营养因子(BDNF)mRNA水平.结果表明,核磁共振图谱和紫外-可见光谱证明聚赖氨酸成功地接枝到了丝素蛋白膜上,CCK-8检测显示:从第3天开始一直到第7天,NSCs在Silk-PIL上的增殖活性要显著高于Silk组(P＜0.05),而与PLL组无显著性差异(P＞0.05).免疫荧光观察显示,NSCs在Silk-PIL上分化成神经元的细胞显著多于Silk组(P＜0.05),而与PLL组无显著性差异,3个组之间分化为星型胶质细胞的数量并无显著性差异.Western blotting和TUNEL 检测结果表明Silk-PIL组NSCs凋亡程度显著小于Silk组(P＜0.05),但与PLL组无显著性差异(P＞0.05).RT-PCR结果显示,NSCs在Silk-PIL和PLL组的BDNF mRNA表达水平显著高于Silk组(P＜0.05).结果表明,聚赖氨酸修饰的丝素蛋白膜能够促进NSCs的增殖活性并减少NSCs细胞凋亡,同时促进NSCs向神经元方向分化,有望成为新型组织工程支架材料搭载NSCs移植修复中枢神经系统损伤.

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来源
《生物工程学报》 |2018年第10期|1650-1659|共10页
作者
赵晓阳; 邓立志; 邓宇斌; 万勇; 张黎明;
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作者单位

中山大学附属第一医院脊柱外科,广东广州 510080;

中山大学材料科学与工程学院,广东广州 510080;

中山大学附属第七医院骨科研究中心,广东深圳 518107;

中山大学附属第一医院脊柱外科,广东广州 510080;

中山大学材料科学与工程学院,广东广州 510080;

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正文语种 chi
中图分类
关键词
神经干细胞; 聚赖氨酸丝素蛋白膜; 生物材料; 细胞分化;

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