CD137-CD137L信号通路对小鼠动脉粥样斑块及血管平滑肌细胞钙化的影响

陈瑶; 严金川; 翁嘉懿; 王中群; 王翠平; 邵晨

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目的探讨CD137-CD137L信号通路对动脉粥样斑块及血管平滑肌细胞（VSMC）钙化的影响。方法（1）体内实验:载脂蛋白E基因敲除(ApoE-/-小鼠)15只,8周龄,抓阍法随机分为3组,CD137刺激组（腹腔注射刺激型CD137抗体200μg）,CD137抑制组（腹腔注射抑制型CD137抗体200μg+刺激型CD137抗体200μg）和对照组,每组5只小鼠。采用Von kossa染色法检测各组小鼠主动脉斑块钙化程度。免疫组织化学染色检测小鼠主动脉斑块中骨形成蛋白-2（BMP-2）及Runx2蛋白表达水平。（2）体外细胞实验:采用组织块贴壁法培养C57BL/6J小鼠胸主动脉VSMC。实验分为4组,对照组（DMEM+10%FBS+10 mmol/L 3-甘油磷酸钠）、CD137刺激组（刺激型CD137抗体）、CD137抑制组（抑制型CD137抗体+刺激型CD137抗体）、同型对照组（IgG2b）。分别采用Von kossa染色和甲基百里香酚蓝法检测细胞钙化及细胞内钙含量。采用实时荧光定量PCR法检测BMP-2和Runx2成骨相关蛋白mRNA表达水平。采用Western blot法检测各组主动脉斑块中BMP-2和Runx2蛋白表达水平。结果（1）体内实验:CD137刺激组ApoE-/-小鼠主动脉斑块钙化面积大于对照组[（1.75±0.33）×10~4μm~2比（0.23±0.07）×10~4μm~2,P＜0.01],而CD137抑制组则小于CD137刺激组[（0.83±0.30）×10~4μm~2比（1.75±0.33）×10~4μm~2,P＜0.05]。CD137刺激组BMP-2和Runx2蛋白表达水平均高于对照组（P均＜0.01）,而CD137抑制组则均低于CD137刺激组（P均＜0.05）。（2）体外细胞实验:CD137刺激组VSMC钙化程度高于对照组,细胞内钙离子含量高于对照组[（0.001 3±0.000 2）mmol/mg蛋白比（0.000 7±0.000 2）mmol/mg蛋白,P＜0.01],BMP-2和Runx2 mRNA和蛋白表达水平均高于对照组（P均＜0.05）。而CD137抑制组VSMC钙化程度较CD137刺激组弱、细胞内钙含量少[（0.000 9±0.000 2）mmol/mg蛋白比（0.001 3±0.000 2）mmol/mg蛋白,P＜0.05],BMP-2和Runx2 mRNA和蛋白表达水平亦均较CD137刺激组低（P均＜0.05）。结论激活CD137-CD137L信号通路可促进小鼠动脉粥样斑块和VSMC钙化形成。

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来源
《中华心血管病杂志》 |2016年第10期||共页
作者
陈瑶; 严金川; 翁嘉懿; 王中群; 王翠平; 邵晨;
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作者单位

江苏大学附属医院心内科;

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正文语种 chi
中图分类动脉疾病;
关键词
动脉粥样硬化; 抗原; CD137; 肌细胞; 平滑肌; 血管;

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