蛋白激酶C结合蛋白1参与心力衰竭小鼠心脏去甲肾上腺素转运蛋白的表达下调

靳文英; 乔正国; 郑春华; 李素芳; 陈红

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目的观察去甲肾上腺素转运蛋白（NET）和蛋白激酶C结合蛋白1（PICK1）的相互作用,并检测慢性心力衰竭小鼠心脏NET和PICK1 mRNA和蛋白的表达变化。方法（1）细胞实验:293T细胞分为4组,分别转染质粒NET（NET组）、GFP-PICK1（GFP-PICK1组）、NET+GFP-PICK1（NET+GFP-PICK1组）以及NET+GFP-PICK1（KD-AA）[NET+GFP-PICK1（KD-AA）组],48 h后行免疫荧光化学染色进行亚细胞定位检测。（2）动物实验:雄性C57BL/6J小鼠分为阿霉素组和正常对照组（对照组）,每组各20只小鼠,分别于腹腔注射阿霉素(2 mg·kg-1·次-1,累计用量22 mg/kg)和生理盐水。实验第10周末采用实时荧光定量聚合酶链反应和蛋白质免疫印迹法检测心脏NET、PICK1和肾上腺素能受体（β1-AR）的mRNA和蛋白表达水平。结果（1）:PICK1与NET结合并介导NET的亚细胞定位。（2）阿霉素组和对照组小鼠颈交感神经节中NET mRNA的表达量分别为0.59±0.15和0.64±0.18,差异无统计学意义（P＞0.05）。但阿霉素组PICK1 mRNA表达量明显低于对照组（0.73±0.13比1.18±0.15,P＜0.05）,且β1-AR的mRNA表达量亦显著低于对照组（0.62±0.12比1.00±0.11,P＜0.05）。（3）阿霉素组小鼠心脏NET蛋白表达量明显低于对照组（0.72±0.04比0.75±0.03,P＜0.05）,而酪氨酸羟化酶蛋白表达量则显著高于对照组（0.95±0.06比0.84±0.07,P＜0.01）。（4）阿霉素组和对照组小鼠的心脏交感神经纤维密度无明显差异。结论慢性心力衰竭小鼠心脏NET、PICK1的mRNA和蛋白表达均下调,PICK1介导的NET亚细胞定位障碍可能是心力衰竭时NET功能障碍的机制之一。

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来源
《中华心血管病杂志》 |2014年第3期||共页
作者
靳文英; 乔正国; 郑春华; 李素芳; 陈红;
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作者单位

北京大学人民医院心脏中心;

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正文语种 chi
中图分类血液循环衰竭;
关键词
心力衰竭; 充血性; 蛋白激酶C; 交感神经系统;

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