Kindlin–2对血管平滑肌细胞迁移和黏附的影响及其机制的实验研究

吴校林; 江洪; 陈静; 胡琦; 张静; 王继春

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目的探讨Kindlin–2 RNA干扰对血管平滑肌细胞（VSMC）迁移、黏附以及β1整合素的影响,并进一步探讨Kindlin–2与β1整合素之间的关系。方法构建Kindlin–2小干扰RNA（siRNA）慢病毒载体感染原代培养的VSMC。实验分为空白对照组、阴性对照组和Kindlin–2 siRNA组。通过Transwell和细胞划痕实验检测VSMC的迁移能力。细胞基质黏附实验检测VSMC黏附细胞外基质的能力。实时定量PCR和Western blot分别检测Kindlin–2与β1整合素的mRNA和蛋白表达水平。流式细胞技术检测VSMC表面总β1整合素和激活β1整合素的表达。结果 Kindlin–2 siRNA慢病毒感染VSMC的效率达90%以上。Kindlin–2 siRNA组VSMC迁移数量低于空白对照组和阴性对照组（P均＆0.05）,且VSMC迁移的距离较空白对照组和阴性对照组短（P均＆0.05）。Kindlin–2 siRNA组VSMC黏附胶原Ⅰ的数量较空白对照组和阴性对照组少（P均＆0.05）,另外A590 nm也较空白对照组和阴性对照组低（P均＆0.05）。Kindlin–2 siRNA组Kindlin–2 mRNA表达水平较空白对照组低了47%（P＆0.05）,但β1整合素mRNA表达水平与空白对照组比较差异无统计学意义。Kindlin–2 siRNA组Kindlin–2蛋白表达水平较空白对照组和阴性对照组低（P均＆0.05）,3组间β1整合素蛋白表达水平差异无统计学意义。Kindlin–2 siRNA组VSMC表面激活β1整合素表达水平低于空白对照组和阴性对照组（P均＆0.05）,而细胞表面总β1整合素表达水平与空白对照组和阴性对照组比较差异均无统计学意义。结论 Kindlin–2可以调节VSMC的迁移和黏附,激活VSMC表面β1整合素。

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来源
《中华心血管病杂志》 |2014年第11期||共页
作者
吴校林; 江洪; 陈静; 胡琦; 张静; 王继春;
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作者单位

武汉大学人民医院心血管内科;

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原文格式 PDF
正文语种 chi
中图分类血管疾病;
关键词
肌细胞; 平滑肌; 血管; 细胞运动; 细胞黏附; 整合素类; Kindlin–2;

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